Análisis “in vivo”

Evaluar los efectos antitumorales y la toxicidad aguda oral del producto en ratas

Composición: Confidencial

Objetivo del ensayo: Evaluar los efectos antitumorales y la toxicidad aguda oral del producto en ratas.

Animales de experimentación: Se emplearon ratones albinos de la cepa AJ, de tres meses de edad.

Procedimientos: Se confeccionaron 14 grupos de 3 y 4 animales de sexo masculino por dosis. La solución se aplico oralmente durante siete días a partir de las dosis graduadas determinadas a cada grupo de experimentación.

Registros: Para registrar cualquier síntoma, luego de aplicar la dosis, los animales fueron observados constantemente, por varios minutos y se registraron los procedimientos y alteraciones observadas mediante fotografía digital y registro de fichas de observación.

Análisis Estadístico: Los análisis estadísticos se realizaron de acuerdo al esquema estandarizado, donde:

– Intra-grupo: Se compararon los tamaños de tumores medidos y la sobrevida en los periodos de observación por dosis evaluada.

– Entre-grupos: Se compararon los tamaños de tumores medidos y la sobrevida entre las dosis administradas para cada
periodo.

Consideraciones bioéticas: Este proyecto se realizo de acuerdo al manual de recomendaciones sobre Bioseguridad en la experimentación biotecnológica, publicado en 1992, por el comité nacional de Biotecnología que contiene las normas para el manejo de animales, bacterias, radioisótopos, compuestos cancerígenos, agentes químicos de riesgo y moléculas de ADN recombinante. Además se contemplaron las normas de bioseguridad de la OMS, OECD y la EPA.

Manejo de desechos biológicos: Los desechos biológicos fueron retirados por Procesan S.A., firma que mantiene un convenio permanente con la facultad de medicina de la universidad de Chile.

– Se logró la confección de un modelo para el estudio de la capacidad antineoplásica para la substancia vegetal tanto en su forma liofilizado (Q³Inicia®) como para su extracto en un modelo de ratón AJ, inoculado con células cancerígenas TA3.

– Se administraron oralmente las dosis de 0.02 mL (Dosis 1: 0,128 mg), 0.04 mL (Dosis 2: 0.256 mg) y 0.08 mL (Dosis 3: 0.512 mg) de una solución stock de 6.4mg/mL de extracto de la planta y el liofilizado (Q³Inicia®) de esta, respectivamente versus un control sin tratamiento (control negativo) durante siete días.

– Se observó crecimiento de tumores en todos los animales inoculados, encontrándose diferencias estadísticamente significativas en los animales tratados con el extracto liofilizado Q³Inicia® v/s el blanco.

– No se observaron diferencias en el peso de los animales sanos, tratados con las diferentes dosis, lo que señala que no existe un efecto toxicológico relevante por parte de los componentes del extracto y Liofilizado (Q³Inicia®) en ratones.

– Posterior a la eutanasia y necropsia fue posible observar que no hubo efectos en los órganos internos de los animales sanos. Este procedimiento se realizo por el médico veterinario integrante del grupo de investigadores del proyecto.

– Se observaron diferencias en cuanto a la sobrevivencia de los animales con tumores comparados con el control, las cuales no alcanzaron a ser estadísticamente significativas.

– El estudio realizado muestra que el liofilizado (Q³Inicia®) redujo de manera considerable, estadísticamente significativa, el tamaño de los tumores, siendo las dosis 1: (0.128 mg) y dosis 2: (0.256 mg), las más efectivas. La dosis mayor 3: (0.512 mg), no mostro resultados satisfactorios.

– La dosis 2: (0.256 mg) y 3: (0.512 mg) de extracto generaron una respuesta satisfactoria y estadísticamente significativa, homologa a lo obtenido con las dosis 1 y 2 del liofilizado (Q³Inicia®). Ello sugiere, por una parte, una mayor eficacia antitumoral del liofilizado, y por otra parte, que existe una relación de 2:1 en esta eficacia entre el liofilizado (Q³Inicia®) y el extracto.

– Finalmente, este extracto, realizado bajo norma internacional muestra que, ambos productos, liofilizado y extracto, no son tóxicos a las dosis utilizadas, poseen un efecto significativo en la disminución del tamaño tumoral del modelo en estudio y producen un efecto considerable, en la sobrevida de los animales.